Products
Lifecosm SARS-Cov-2-RT-PCR Kit Detection ji bo 2019-nCoV
Bikaranîna hêvîkirî
Ev kît ji bo tespîtkirina kalîteyî ya coronavirusê nû (2019-nCoV) bi karanîna şûşeyên qirikê, şûşeyên nasopharyngeal, şilava lavajê ya bronchoalveolar, xûyê tê bikar anîn. Encama tespîtkirina vê hilberê tenê ji bo referansa klînîkî ye, û divê ew wekî yekane neyê bikar anîn. delîlên ji bo teşhîs û dermankirina klînîkî. Analîzek berfereh ya rewşê li gel diyardeyên klînîkî yên nexweş û ceribandinên laboratîf ên din tê pêşniyar kirin.
prensîba teftîşê
Kit li ser teknolojiya RT-PCR ya yek-gavekî ye.Di rastiyê de, genên ORF1ab û N-ya koronavirusê ya 2019-a nû (2019-nCoV) wekî herêmên armanca zêdekirinê hatin hilbijartin.Destpêker û sondayên fluorescentê yên taybetî (lêkolînên genê N bi FAM û sondajên ORF1ab bi HEX têne nîşankirin) hatine sêwirandin ku di nimûneyan de RNA-ya koronavirusê ya celebê nû ya 2019-an tespît bikin.Kit di heman demê de pergalek tespîtkirina kontrola hundurîn a endojen (lêkolîna genê ya kontrolê ya hundurîn ku bi CY5 hatî nîşankirin) vedihewîne da ku pêvajoya berhevkirina nimûneyê, RNA û zêdekirina PCR bişopîne, bi vî rengî encamên neyînî yên derewîn kêm dike.
pêkhateyên sereke
| Components | Bend(48T/Kit） |
| Çareseriya reaksiyonê ya RT-PCR | 96 μl |
| nCOV primer TaqMan probemixture (ORF1ab, N Gene, RnaseP Gene) | 864 μl |
| Kontrola neyînî | 1500 μl |
| nCOV Kontrola erênî (l ORF1ab N Gene) | 1500 μl |
Reagentên xwedan: RNA derxistin an reagentên paqijkirinê.Kontrola neyînî/erênî: Kontrola erênî RNA ye ku perçeya armancê vedihewîne, lê kontrola neyînî ava bê asîdên nukleîk e.Di dema karanîna de, divê ew beşdarî derxistinê bibin û divê wekî enfeksiyonê bêne hesibandin.Pêdivî ye ku ew li gorî rêzikên têkildar werin xebitandin û avêtin.
Gena referansa navxweyî gena RnaseP ya mirovî ye.
Şert û mercên hilanînê û dîroka qedandinê
-20±5℃, ji 5 caran zêdetir ji cemidandin û şilbûnê dûr bixin, ji bo 6 mehan derbasdar e.
Amûra bikêrhatî
Bi FAM / HEX / CY5 û amûrek din a PCR ya fluorescent a pir-kanal.
Pêdiviyên nimûne
1.Cûreyên nimûneyê yên sepandî: şûvên qirikê, şûvên nasopharyngeal, şilava lavajê ya bronchoalveolar, sputum.
2. Komkirina nimûneyan (teknîkî aseptîk)
Swaba farîngeal: Tonsil û dîwarê paşê yê farîngeal di heman demê de bi du şûşeyan paqij bikin, paşê serê şûşê têxin lûleya testê ya ku tê de çareseriya nimûneyê tê de heye.
Sputum: Piştî ku nexweş ketibû kuxek kûr, xûka kuxiyayî di lûleya testê ya qepûkê ya ku tê de çareseriya nimûneyê tê de kom bikin;Avêtina lavajê ya bronchoalveolar: Nimûne ji hêla pisporên bijîjkî ve.3.Storage û veguhestina nimûneyan
Nimûneyên ji bo veqetandina vîrus û ceribandina RNA divê di zûtirîn dem de bêne ceribandin.Nimûneyên ku di nav 24 demjimêran de têne dîtin dikarin di 4℃ de bêne hilanîn;yên ku di nav 24 de nayên dîtin
Divê demjimêr di -70℃ an jêrtir de bêne hilanîn (heke şertê hilanînê -70℃ tune be, divê ew werin hilanîn.
bi demkî li -20 ℃ sarincê tê hilanîn).Nimûne divê di dema veguheztinê de ji cemidandin û şilbûna dubare dûr bikevin.Nimûne divê piştî berhevkirinê di zûtirîn dem de ji laboratuarê re bêne şandin.Ger hewce be ku nimûne ji dûr û dirêj ve werin veguheztin, hilanîna cemeda hişk tê pêşniyar kirin.
Rêbazên Testê
1 Pêvajoya nimûne û derxistina RNA (herêma pêvajoyê ya nimûne)
Ji bo derxistina ARNyê tê pêşniyar kirin ku 200 μl nimûneya şil were girtin.Ji bo gavên derxistina têkildar, serî li rêwerzên kîtên derxistina RNA yên bazirganî bidin.Hem neyînî û hem jî neyînî
kontrolên di vê kîtê de tevlî derxistinê bûn.
2 Amadekirina reagentê ya PCR (qada amadekirina reagentê)
2.1 Hemî hêmanan ji kîtê derxînin û li germahiya odeyê bihelînin û tevlihev bikin.Berî ku bikar bînin, çend saniyan di 8000 rpm de santrîfuj bikin;mîqdara pêwîst a reagentan hesab bike, û pergala reaksiyonê wekî ku di tabloya jêrîn de tê xuyang kirin tê amadekirin:
| Components | Xizmeta N (pergala 25µl) |
| nCOV primer TaqMan probemixture | 18 μl × N |
| Çareseriya reaksiyonê ya RT-PCR | 2 μl × N |
| *N = hejmara nimûneyên hatine ceribandin + 1 (kontrola neyînî) + 1 (nCOVkontrola erênî) | |
2.2 Piştî tevhevkirina pêkhateyan, ji bo demek kin santrîfuj bikin da ku hemî şilava li ser dîwarê lûlê bikeve binê lûlê, û dûv re pergala zêdekirina 20 µl di lûleya PCR de bihêle.
3 Nimûnekirin (qada amadekirina nimûneyê)
Piştî derxistinê 5 μl ji kontrolên neyînî û erênî zêde bikin.RNA ya nimûneya ku tê ceribandin li lûleya reaksiyonê ya PCR tê zêdekirin.
Berê ku wê veguhezînin qada tespîtkirina amplificationê, lûlê hişk bipêçin û çend saniyan bi 8000 rpm santrîfuj bikin.
4 Zêdekirina PCR (herêma tespîtkirina zêde)
4.1 Tîpa reaksiyonê di hucreya nimûneya amûrê de bi cîh bikin, û pîvanan wekî jêrîn bicîh bikin:
| şanocî | Zîvirok jimare | Germî(°C) | Dem | berhevkirîsite |
| Gara paşîtranskrîpsîyon | 1 | 42 | 10min | - |
| Pre-denaturationn | 1 | 95 | 1min | - |
| Zîvirok | 45 | 95 | 15s | - |
| 60 | 30s | berhevkirina daneyan |
Hilbijartina kanala tespîtkirina amûrê: Ji bo sînyala floransê kanala FAM, HEX, CY5 hilbijêrin.Ji bo referansa fluorescent NONE, ji kerema xwe ROX hilbijêrin.
5 Analîzkirina encamê (Ji kerema xwe ji bo sazkirinê li rêwerzên ceribandinê yên her amûrekê binihêrin)
Piştî reaksiyonê, encamên xilas bike.Piştî analîzê, li gorî wêneyê nirxa destpêkê, nirxa dawîn, û nirxa sînorê bingehîn rast bikin (bikarhêner dikare li gorî rewşa rastîn rast bike, nirxa destpêkê dikare li 3~15 were danîn, nirxa dawî dikare were danîn 5~20, verastkirin) di grafiya logarîtmîkî de Li ber deriyê pencereyê, xeta boriyê di qonaxa logarîtmîkî de ye, û keviya zêdekirina kontrolê ya neyînî xêzek rast e an li binê xeta boriyê ye).
6 Kontrola qasê (Kontrolek prosedurî di ceribandinê de tê de heye) Kontrola neyînî: Ji bo kanalên tespîtkirina FAM, HEX, CY5 xêzika zêdekirina eşkere tune
Kontrola erênî ya COV: keviya xurtkirina eşkere ya kanalên tespîtkirina FAM û HEX, nirxa Ct≤32, lê çu keviya zêdekirina kanala CY5 tune;
Pêdiviyên jorîn divê di heman ceribandinê de hevdem bêne bicîh kirin;wekî din, ceribandin nederbasdar e û pêdivî ye ku were dubare kirin.
7 Diyarkirina encaman.
7.1 Ger di kanalên FAM û HEX yên nimûneya ceribandinê de xêzika zêdekirinê an nirxa Ct> 40 tunebe, û di kanala CY5 de kelekek zêdekirinê hebe, meriv dikare were darizandin ku 2019 coronavirusê nû (2019-nCoV) tune ye. ARN di nimûneyê de;
.2 Ger nimûneya ceribandinê di kanalên FAM û HEX de xwedan kelûpelên bihêzkirina eşkere be, û nirxa Ct ≤40 be, meriv dikare were darizandin ku nimûne ji bo coronavirusê nû ya 2019-an (2019-nCoV) erênî ye.
7.3 Ger nimûneya ceribandinê tenê di kanalek FAM an HEX de xwedan kêşek mezinbûnê ya zelal be, û nirxa Ct ≤40 be, û di kanala din de qulika zêdekirinê tune, pêdivî ye ku encam ji nû ve werin ceribandin.Ger encamên ji nû ve ceribandinê hevgirtî bin, nimûne dikare ji bo ya nû erênî were hesibandin
coronavirus 2019 (2019-nCoV).Ger encama ji nû ve ceribandinê neyînî be, meriv dikare were darizandin ku nimûne ji bo coronavirusê nû 2019 (2019-nCoV) neyînî ye.
Nirxa dîwana erênî
Rêbaza kembera ROC ji bo destnîşankirina nirxa referansa CT ya kîtê tê bikar anîn û nirxa referansa kontrola navxweyî 40 e.
Şîrovekirina encamên testê
1.Divê her ceribandinek ji bo kontrolên neyînî û erênî were ceribandin.Encamên îmtîhanê tenê dikare were destnîşankirin dema ku kontrol hewcedariyên kontrolkirina kalîteyê bicîh tîne
2. Dema ku kanalên tespîtkirina FAM û HEX erênî ne, ji ber pêşbaziya pergalê dibe ku encam ji kanala CY5 (kanala kontrolê ya hundurîn) neyînî be.
3.Gava ku encama kontrola navxweyî neyînî be, heke kanalên tespîtkirina FAM û HEX ya lûleya ceribandinê jî neyînî bin, ev tê vê wateyê ku pergal neçalak e an operasyon xelet e, test nederbasdar e.Ji ber vê yekê, pêdivî ye ku nimûne ji nû ve bêne ceribandin.
